以下是2025年版《中國藥典》純化水微生物檢驗的核心方法、操作流程及標(biāo)準(zhǔn)要求：

 一、檢驗核心方法：?薄膜過濾法?

?

原理與步驟?

取規(guī)定體積純化水（通常≥1ml）通過孔徑0.45μm的微孔濾膜，微生物被截留在膜表面。

濾膜轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基：需氧菌用?胰酪大豆胨瓊脂（TSA）?，霉菌/酵母菌用?沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）?。

培養(yǎng)條件：

TSA：30-35℃培養(yǎng)3-5天（需氧菌總數(shù)計數(shù)）。

SDA：20-25℃培養(yǎng)5-7天（霉菌/酵母菌計數(shù)）。

?結(jié)果計算?：統(tǒng)計菌落形成單位（CFU），需氧菌總數(shù)≤100 CFU/ml，霉菌/酵母菌總數(shù)≤100 CFU/ml。

?

關(guān)鍵細(xì)節(jié)?

?樣品時效性?：取樣后需在2小時內(nèi)完成檢測，避免微生物繁殖干擾結(jié)果。

?濾膜處理?：過濾后用無菌緩沖液（如pH 7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液）沖洗濾膜，去除抑菌成分殘留。

?陰性對照?：同步進行緩沖液過濾的空白對照實驗，確保無污染

三、操作注意事項

?環(huán)境要求?

操作需在局部潔凈度100級環(huán)境下進行（如超凈工作臺）。

實驗器具需121℃濕熱滅菌，濾頭支持火焰快速滅菌。

?方法驗證?

首次檢驗需進行?方法適用性試驗?，驗證微生物回收率≥70%。

強抑菌性樣品需中和處理（如加聚山梨酯-80）。

?誤差規(guī)避?

避免濾膜過度濕潤導(dǎo)致菌落融合，影響計數(shù)準(zhǔn)確性。

定期校準(zhǔn)流量傳感器，確保抽濾速率≥600ml/min（滿載）